试述流式细胞术(FCM)的工作原理及其特点。

admin2014-11-26 81

问题试述流式细胞术(FCM)的工作原理及其特点。

选项

答案原理：按检测需要标记了特异性荧光染料的单细胞悬液和鞘液，分别经硅化管进入流动室，形成鞘液包裹细胞悬液的稳态单细胞液柱，该液柱以稳定的层流形式通过喷嘴高速射下，液柱与水平方向的高度聚焦的激光束垂直相交，单细胞上标记的荧光染料在通过激光光束时被激发而产生特异性荧光。同时，由于混合细胞群中细胞大小和胞内颗粒的多少会被激发而产生不同的散射光。在入射光束与液柱垂直方向有荧光检测系统和散射光感受系统，用于收集荧光信号，信号经光电倍增管转换成电压脉冲和积分脉冲，使信号放大。该信号进入计算机系统进行数据转换、储存、分析、处理，按不同的检测设计采用相应软件程序对结果进行综合分析。以图像和数据显示于荧光屏上，包括单参数和二维或三维图像资料、阳性细胞百分率、斜率、峰值、峰面积等多参数资料。特点：能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下，通过荧光探针的协助，从分子水平上获取多种信号，对细胞进行定量分析或纯化分选。

解析

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